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继续扒我查的有关抗体的资料,介个抗体标记试剂盒,号称是世界上最简单的抗体标记试剂盒,有这等神奇?呵呵,本博文有广告嫌疑,但找生物是没有收好处费的,纯属瞎扒!

特性:

  1. 非常简单
  2. 只需要一个步骤
  3. 只需30 s的手工操作时间
  4. 重复性高
  5. 可标记ug级到mg级抗体
  6. 100%的回收率

Lightning-Link™ 抗体标记示意图

Lightning-Link™ 试剂盒与传统标记方法相比,简单易用,耗时少,无需标记经验,回收率高,以Lightning-Link™ Biotin Conjugation Kit为例,基本的步骤是:

1. 加入1 µl 的 Lightning-Link 修饰剂 (LL-修饰剂)到每10 µl 蛋白溶液中。蛋白总量取决于您所使用的试剂盒,从100 µg 到2 mg不等。蛋白溶液的体积可以进行优化。

2. 蛋白/修饰剂混合物加入到已有冻干试剂混合物的试管中,孵育2 小时或过夜。

3. 加入1 µl的LL-淬灭剂(10 µl 蛋白需1 µl 淬灭剂) ,孵育30 分钟。之后,生物素-蛋白就可以使用了。因为无需移除未反应的蛋白,蛋白回收率达100%。

表一 Lightning-Link™ 试剂盒与其他品牌抗体标记试剂盒的主要参数比较:

 

特性 Supplier I1 Supplier I2 Supplier I3 Supplier S1 Supplier S2 Supplier D Lightning-Link
手工操作时间 2 分钟 20 分钟 30 分钟 30 分钟 30 分钟 10 分钟 30 秒
是否过柱
试剂盒组分 6 7 5 9 12 6 3
操作步骤 5 11 16 27 31 8 3
抗体标记时间 10 分钟 2.5 小时 2 小时 1.5 小时 4 小时 1 小时 2 小时
可标记抗体量 1-20 ug 10-20 ug 20-100 ug 25 ug-5 mg 100 ug 50-200 ug 100 ug-5 mg
连接键 非共价连接* 共价连接 共价连接 共价连接 共价连接 共价连接 共价连接
抗体亚型 仅IgG 仅IgG 所有 仅IgG 仅IgG 仅IgG 所有

*非共价连接的抗体标记物只能稳定30 分钟,因此必须在这个时间段内使用。

Lightning-Link™ 试剂盒可以在一抗上标记43种独立的标记物,如酶、荧光蛋白、染料等,标记后的抗体适于多种应用:WB、ELISA、IHC、FACS、IF、FRET(荧光共振能量转移)等。与间接免疫检测(一抗+标记二抗)相比,标记一抗可以帮助您:

1.进行多蛋白复合体研究;

2.无需使用二抗,避免了因此带来的交叉反应及非特异性结合问题;

3.无需使用二抗,减少孵育与洗涤步骤,节约您的试剂和时间。

更多的资料就不转了,自己google吧



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