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ELISA实验宝典

实用 你是第4051个围观者 4条评论 供稿者: 标签:

所谓的宝典只不过是些操作经验,不过也值得借鉴!老手直接忽视吧!

1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行校正。校正方法自己放狗吧,但最好有专业人员进行矫正。
2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支(靠,基本是废话了)。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时(应该是特别是!)。
3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定(这个是容易忽视的!)。
4、实验时,要使底物避光保存
5、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去(应该是加样的时候,板上稀释不算的吧)。
8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能(注意是平行晃动,即上下or左右)。
9、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发(老办法是放入湿盒内,纱布加点无菌水即可)。
10、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干(报纸就免了吧!)。
11、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存(洗液先用现配不费多少事的)。
12、底物是光敏感的,要在临用前现配(同前,避光!)。
13、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
14、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触(终止液为硫酸,小心毁容)。
15、待检样品要澄清,否则会影响结果。
16、温浴时间应遵守试剂盒规定。
17、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。
18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。

看完后才发现所谓宝典,不需自宫也想自宫了,egg有点小痛,真的不能称得上有很大价值,但有注意总比没有好,老手请直接忽视!



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各种观点
    • 多谢,不过不是我做的主题,也是拿来主义,但我最终没有找到具体叫什么名字的主题

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