文章一次性生物反应器实现大规模灌注培养与高密度分批补料培养

生研小白 发表了文章 • 0 个评论 • 190 次浏览 • 2017-05-06 10:08 • 来自相关话题

灌注培养是一种众所周知的药物生产方法,多年来已被广泛的应用于许多生物技术药物的生产工艺中,如凝血因子(凝血八因子VIII:拜耳的Kogenate与辉瑞的Refacto;凝血七因子VII:诺和诺德的Novoseven)、蛋白质C(礼来的Xigris)以及其它酶类药物,当然还包括单克隆抗体(杨森生物技术的ReoPro与的Remicade;诺华的Simulect,等等)。最近,灌注培养还被用于高细胞密度的种子培养,以缩减达到最终生产规模所需的种子培养步骤。

随着细胞培养技术的不断改进,高密度补料分批培养与灌注培养的结合能够实现更高的细胞密度与产品表达浓度,因此如今只需更小的培养体积与生物反应器规模,便可生产治疗性蛋白质或抗体。这项技术的发展使得生产设备的规模更小,进而减少了从临床研究规模放大到商业化生产规模过程中不可预计的一些问题。目前细胞培养工艺愈来愈得到强化,使用一次性反应器也将变的更具有优势,因为一次性的生物反应器BIOSTAT®SRT能够提供最大可达2000L的生产规模,就可以获得过去十至二十倍甚至更大的生物反应器才能实现的生产规模。此外,现代最新的细胞培养工艺的目标是维持细胞处于良好的代谢状态,以控制蛋白质的折叠与糖基化,确保获得质量稳定的产品,因此其主要目的并非必须达到非常高的细胞密度,而是必须确保生物反应器中稳定的营养物质供应与代谢产物生成。

  
如何进行高密度分批补料培养或灌注培养

在生物反应器接种以及初始1-2天的分批生长阶段后,开始采用适当的设备(例如,RefineATF系统等)以恒定的收获流速去除无细胞上清液,同时,在培养液中补充新鲜的培养基...

文章灭菌验证确认需考虑的10件事

生研小白 发表了文章 • 0 个评论 • 300 次浏览 • 2017-04-11 21:21 • 来自相关话题


灭菌器验证/确认对于所有用于生物灭菌、生物医学和制药行业的设备都是强制的,灭菌可以通过物理或者化学的方式,主要物理方式就是高压灭菌法,其他物理方法包括沸腾和干热。
采用化学物质进行灭菌的包括气体环氧乙烷和甲醛,液体如戊二醛。所有这些消毒剂,其中高压灭菌法是最快最可靠的,这也是为什么监管机构总是会仔细审查高压灭菌器验证/确认活性,这里有10条注意事项需在高压灭菌柜确认中考虑的问题。
  1. 在对多孔产品蒸汽灭菌测试开始前必须满足正确的测试条件。首要条件是灭菌产品的饱和蒸汽质量。理想状态下的灭菌蒸汽是干燥饱和蒸汽和携带水(干燥度≥97%)。最大的热传递放生在蒸汽临界条件。如果蒸汽干燥或则含有气体,它将无法凝结导致效率降低。
  2. 用于测试的设备必须能够满足21CFR第11部分的要求,必须足够精准。测试用设备不合适也可能是一个重大问题,因此,需从值得信赖的供应商处购买。作为小温度范围准确度要求(几度),设备的整体测量链条的准确性是非常重要的。
  3. 在关键设备如高压灭菌器的确认中的系统描述作为第一印象是非常重要的。优秀的描述可以看出你对设备的了解和设备所有关键点都是可控的。这些描述必须包含使用的所有程序,设备怎么工作,多少控制探头位于设备那个位置,如何调节整个程序。
  4. 使用说明书、校验和维护温度测试之前必须确认和检查操作指令是否有效。是否设备经过校准和系统从上次到现在经过了维护。使用说明书必须包括灭菌参数,计划项目和温度探头在前提中的位置。而重点是仪器的校准,因为微小的温度错误将导致很大程度上F0值的影响。
  5. 过程的一个最常见错误是不准确的测试程序。这个测试程序必须明确和准确,不得产生不同的解释。模棱两可:热电偶放置于玻璃瓶中。明确:把热电偶放置于玻璃瓶的底部和边缘之间(这个是收集冷凝最关键的地方)。相关:培训你的员工基于风险的设备确认
  6. 负载最常见的问题是关于装载。描述不充分,导致生产不能将确认过的装载使用到实际生产中。可以采用拍照和方案中装载模式作对比。这个将避免描述性问题的任意解释,尽管有时温度分布和空气过滤器似乎已经是老生常谈的问题。特别注意最坏情况的装载解释(主要是过滤器和硅胶管。)
  7. 热电偶位置,热电偶位置必须明确和准确,以避免执行过程不同的解释。不要进入讨论热点偶位置。当然关键区域必须被覆盖到,这个必须在基本原理解释到,当灭菌液体装载验证中必须对最大和最小装载进行测试以确定最冷和最热点。
  8. 热穿头测试的接受标准,法规之间的差异性(如PDA技术报告和EN285),最好考虑到所有合格标准是最好的。特别强调应该在平衡时间和温度,因为他要求一个好的F0值。
  9. 偏差。偏差不能被遗忘,因为他们可能在整个确认过程经常遇到。一个有效的偏差管理过程应该存在,因为他们可能会影响产品的质量。良好的偏差处理程序帮助我们关键我们的确认,尽管他们常常被认为是负面和作为过程改进的一种机制。
  10. 报告。报告的数据应该准备,因为他们消除了方案中使用的数据和发现错误的能力。报告应该包含时间和日期,参数,温度结果,BI结果,热电偶位置,F0和最初的对比结果,确定工艺偏移的趋势。

文章稳定性考察周期内若质量标准或检验方法发生了变更如何处理?

生研小白 发表了文章 • 0 个评论 • 255 次浏览 • 2017-04-11 21:17 • 来自相关话题

答:可根据实际情况进行评估与判断。可能分二种情况:第一是在稳定性考察周期内质量标准发生了变更,例如限度进行了紧缩和增加了新的考察项目;第二是在稳定性考察周期内检验方法发生了变更。不论哪种情况通常会有三种处理结果:采用新稳定性方案放弃老方案,采用原稳定性方案不变和新老稳定性方案同步进行。例如: 
  • 紧缩了限度——应评估稳定性样品初始检测结果是否符合新质量标准的要求。如符合则可直接升级稳定性方案,执行新方案;如不符合,则需要考虑工艺的内控或改进后再重新进行三批稳定性考察。如果原稳定性检测有必要持续下去(例如有实际价值和意义),可能会采用新旧方案同步进行。 
  • 加了新考察项目——如果增加的检测项目是初始检测时也没有的项目,要根据实际情况进行评估与判断(例如:刚开始、要关闭、实际价值和意义),决定采用新方案还是新旧方案都进行。 
  • 分析方法发生了变更:如考察周期内分析方法发生了变更,应评估变更前后方法的等效性,若方法等效,原稳定性方案持续进行,但后续的实验点采用新的方法;若方法不等效,则应两种方法平行测试,必要时可考虑重新进行三批稳定性考察或重新留样按新方法进行稳定性。