免疫组化EnVision法
发表于1078 天前 实用 暂无评论 ⁄ 被围观 14,471+

 

Dako

EnVision是DAKO公司推出的一种两步法免疫组化技术,又称为ELPS法。
EnVision比SP,ABC一般的显色比较:
1 要敏感很多,定位比较好:EnVision系统是将二抗和酶联接成一个多聚体(即EnVision)直接放大信号40-50倍,再与已经结合的一抗反应,最后显色剂显色。采用该法可将一抗稀释度提高1~2倍,尤其对抗原表达较弱组织。也有人说SP法敏感度比EnVision高1-2倍,但SP法毕竟不宜用于富含亲生物素物质的组织。
2 非特异性背景少: EnVision法是多聚物上连接二抗和酶,在组织中不含有这种多聚物,从而避免了组织中生物素的干扰。在含生物素较丰富的组织中,用EnVision法比较好。除血细胞较丰富的组织和坏死组织外,其实可省略内源性过氧化物封闭步骤。
3 比较省时:染色步骤为两步,且第二抗体孵育时较短。
EnVision程序:
1) 脱蜡、水化组织切片。
2) 预处理组织切片
3) 蒸馏水漂洗,置于TBS中。
4) 阻断内源性过氧化物酶(仅用于EnVision TM)
5) 蒸馏水漂洗,置于TBS,10分钟
6) 一抗孵育10-30分钟
7) TBS漂洗10分钟
8) EnVisionTM孵育10-30分钟
9) TBS漂洗10分钟
10) 色源底物溶液孵育10分钟
11) 蒸馏水漂洗
12) 复染及封片

延伸阅读:

新的快速高敏免疫组化技术
DAKO公司在中国的代理商
关于常规的SP法及SABC法的实验操作步骤请移步到此观看

Technorati 标签: 抗体应用,Envision,免疫组化

无觅相关文章插件,快速提升流量