现在位置 >首页 > 所有关于Elispot的文章
0+
发表于266 天前 实用 ⁄ 被围观 675+
ELISPOT全名为酶联免疫斑点检测,英文:Enzyme-linked Immunospot Assay。它结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(即ELISA技术),能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。其技术原理,一句话概括就是:用抗 体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子,并以酶联斑点显色的方式将其表现出来(Sedgwick JD 2005)。 该技术检测细胞因子具有三大优点:其一,灵敏度高。在一百万个阴性细胞中只要有一个分泌细胞因子的阳性细胞即可被检测出来。这是目前为止,最为灵敏的检测 技术,灵敏度比传统的的ELISA方法高2-3个数量级...
阅读全文

0+
发表于267 天前 实用 ⁄ 被围观 680+
ELISPOT技术的独特优点已经让它在抗原特异性T细胞免疫学研究上独占鳌头。它是当今唯一能够检测到到百万分之一阳性细胞率的检测技术。如此高的灵敏 度就连流式细胞技术(细胞内细胞因子染色)和tetramer技术也望尘莫及(Letsch A et. al., 2003)。此外由于淋巴细胞的冻存复苏问题也得到了完美的解决,经过冻存复苏的细胞并不丧失免疫功能(Maecker HT et. al., 2005;Kvarnstrom M et. al., 2004)。这一点对临床试验非常重要,它使科研人员得以并行分析免疫治疗前、后的病人血样。如果试验牵涉全国乃至全球多...
阅读全文
0+
发表于291 天前 实用 ⁄ 被围观 745+
第一天:ELISPOT包被程序,提供两种方案供选择(严格注意无菌操作)   方案A: 传统酒精预湿包被程序 该方案中,需经过:70%乙醇预湿PVDF膜、无菌去离子水洗涤去除乙醇、拍干,最后,加入已稀释好的包被抗体到各实验孔完成包被操作。 具体操作如下: 1.          实验卡片填写:设计好试验,把每个孔要加入的内容做成卡片,到时候就会从容很多。 2.          每孔加入15μL 70%的乙醇预湿。 注意: ²      未润湿PVDF膜是洁白、不透明的;经乙醇润湿后,颜色变暗,呈半透明状,很容易观察二者的区别。 ²      加乙...
阅读全文