小技巧之如何把SDS-PAGE胶转移到两块膜上
发表于204 天前 技巧 评论数 2 ⁄ 被围观 1,371+

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您是否曾希望同一块SDS-PAGE胶能够转移两次?(找生物承认有过)如果能有实现多次转移是件挺幸福的事情,下面这个小技巧就可以实现,怀着期待的心情我们共同来学习下吧:

  • 找一块玻璃板,或者其他的比较平而坚硬的板;
  • 把下列物品按顺利依次放置在玻璃板上,并确保平放,赶走气泡:
  • 3块blotting paper (例如 Whatman 3MM) ,预先用PBS溶液浸润;
  • 预先浸润的膜 (仅试过硝酸纤维膜,PVDF膜效果更佳);
  • 胶.
  • 另外一块预先浸润的膜;
  • 至少三块用PBS溶液预先浸润的blotting paper.
  • 再在上面加一块玻璃板;
  • 紧紧包紧以上三明治物品;
  • 在上面放一个比较重的物品 (例如装满缓冲液的1L瓶) ;
  • 然后就可以等待过夜,或者过一个愉快的周末了.

图示

蛋白转移采用自行扩散的方法比采用电转移要慢很多,但是如果有足够长的时间,其转移效率也是非常惊人的!但是,有一点缺陷是对于大分子量的蛋白部推荐采用此方法,同时,还有一点需要注意,转移到两块膜上的量的总和是转移到一块膜上的量(O(∩_∩)O~)。

有兴趣的童鞋可以试试这个方法,看来没有多少技术含量的工作,有时候也能给你打来惊喜哦,也可以到找生物博客或者微博上与大伙分享交流。

找生物翻译!原文链接:http://bitesizebio.com/articles/how-to-transfer-one-sds-page-gel-onto-two-membranes/

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